由于免疫系统固有的复杂性，因此用于识别每个亚群所需的标记数量也在不断增加。然而，用于免疫监视的常规方法存在诸多限制。例如，流式细胞仪通常需要使用更为复杂的工作流程来实现包括多个样品和对照管的庞大实验设计方案和体系，这些样品管和对照管对珍贵生物样品来说无疑是巨大的浪费，并大幅增加了抗体使用量。此外，还需要通过复杂且耗时的数据分析过程进行荧光补偿、去除细胞自发荧光干扰等。

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